ন্যাটোকিনেস

নীতি

নেটটোকিনেস ফাইব্রিনে কাজ করে, পেপটাইডের যোগসূত্রটি ভেঙে দেয় এবং কম আণবিক ওজন অ্যাসিড দ্রবণীয় পণ্য তৈরি করে, যা স্পেকট্রোফোটোমিটার দ্বারা পরিমাপ করা হয়।

একটি ফাইব্রিনোলিটিক অ্যাক্টিভিটি ইউনিট (এফইউ) এনজাইমের পরিমাণ হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়, যা পদ্ধতিতে নির্দিষ্ট শর্তাবলী অনুযায়ী প্রতি মিনিটে ফিল্টারেটের শোষণকে প্রতি মিনিটে 0.01 দ্বারা 0.01 বৃদ্ধি করে।

ন্যাটোকিনেসের যুক্তি
1.0.05 এম বোরেট বাফার (পিএইচ 8.5) - প্রায় 200 মিলি ডিআই পানিতে সোডিয়াম বোরেট (Na2B4O710H2O) এবং 4.5 গ্রাম সোডিয়াম ক্লোরাইড (NaCl) দ্রবীভূত করুন। 1 এন এইচসিএল দিয়ে পিএইচ 8.5 এডজাস্ট করুন এবং ডিআই জল যোগ করুন 500 মিলি তৈরি করতে।
2.0.2N টিসিএ - 250 মিলি তৈরির জন্য ডিআই পানিতে 8.17 গ্রাম ট্রাইক্লোরোসেটিক অ্যাসিড (সিসিএল 3 সি 2 এইচ) দ্রবীভূত করুন।
3. থ্রোমবিন সলিউশন - একটি সিরিঞ্জ ব্যবহার করে, থ্রম্বিন বোতলে 0.05M বোরেট বাফারের 5.0 মিলি ইনজেকশন করুন (সিগমা, টি -6634)। সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত করতে এটি আলতোভাবে নাড়ুন। সিরিঞ্জের সাহায্যে, 1 মিলি অ্যালিকোটগুলি প্লাস্টিকের শিশিগুলিতে (100 ইউনিট / শিশি) স্থানান্তর করুন এবং স্টোরেজের জন্য তাদের জমাট করুন।
* ব্যবহারের সময় এক শিশিরের উপাদানটি 0.05 এম বোরেট বাফারের 4 মিলি থেকে মিশ্রিত করুন এবং 20 ইউ / এমিলির চূড়ান্ত ঘনত্ব পাওয়ার জন্য পাইপেটর টিপটির সাথে (এই উপসর্গটি সম্পাদন করার সময় এই একই টিপটি ব্যবহার করুন) মিশ্রিত করুন। এটি সম্পূর্ণ দ্রবীভূত হয়েছে তা নিশ্চিত করুন।

৪.এসিটেট সলিউশন (পিএইচ .0.০) - ডিআই জলের মধ্যে সোডিয়াম অ্যাসিটেটের 12.96 গ্রাম, অ্যানহাইড্রস (সিএইচ 3 সি 2 এন) দ্রবীভূত করুন, 2 এন এসিটিক অ্যাসিড দ্রবণটির 2.38 মিলি যোগ করুন এবং ডিআই জলের সাথে 100 মিলি মিশ্রিত করুন।

10% ট্রাইটন এক্স -100 - হিটিংয়ের সাথে ডিআই জলের মধ্যে ট্রাইটন এক্স -100 এর 5.0 গ্রাম (টি-অক্টাইলফেনোক্সপোলিওথক্সাইথানল) দ্রবীভূত করুন এবং ডিআই জল যোগ করুন 50 মিলি তৈরি করতে। একটি ব্রাউন বোতল মধ্যে সংরক্ষণ করুন।

E.এজাইম ডিলুয়েন্ট - ডিআই জলে ০.৪৪৪ গ্রাম ক্যালসিয়াম সালফেট, ডিহাইড্রেট (সিএএসও H৪ এইচ ২ ও) এবং ০.৫৫ গ্রাম সোডিয়াম ক্লোরাইড (এনএসিএল) দ্রবীভূত করুন, অ্যাসিটেট সলিউশন ২.০ মিলি, এবং ১০% ট্রাইটন সলিউশন এর 0.5 মিলি এবং ডিআই জল তৈরি করুন 1 লিটার।

F.ফাইগ্রিনোজেন সাবস্ট্রেট - মৃদু আলোড়ন দিয়ে অল্প অল্প করে ফিব্রিনোজেন (সিগমা, ভগ্নাংশ I টাইপ আই-এস, এফ 8630) এর সাথে 0.05 এম বোরেট বাফার 10.0 মিলি যোগ করুন এবং 50 এমএল বেকারে সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত করুন। প্রতিদিন তাজা প্রস্তুত করুন (* 1)

                                                                 

নমুনা সমাধান প্রস্তুতি
0.04 এবং 0.08 এর মধ্যে পরিস্রুতের একটি সংশোধন শোষণ (∠† এ) দিতে এনজাইম ডিলুয়েন্টের সাথে নমুনাটি সরু করুন ঘনত্ব সাধারণত 0.67 থেকে 1.33 FU / মিলি

ন্যাটোকিনেসের কার্যবিধির নমুনা

১.পাইপেট ১.৪ মিলি বোরেট বাফার এবং ০.৪ মিলি ফিব্রিনোজেন সাবস্ট্রেট দ্রবণকে উপযুক্ত সেন্ট্রিফিউজ টিউব, ঘূর্ণি এবং 5 মিনিটের জন্য একটি 37 ডিগ্রি ওয়াটার স্নানের মধ্যে সঞ্চারিত করুন।
2. থ্রোমবিন সলিউশনের ঠিক 0.1 মিলি যুক্ত করুন এবং ঘূর্ণিতে সঠিকভাবে মিশ্রিত করুন।
৩. ঠিক ১০ মিনিটের পরে, এনজাইম নমুনা দ্রবণটির 0.1 মিলি যোগ করুন, 5 সেকেন্ডের জন্য মিশ্রণ করুন এবং 37ºC তে মেশান।
4.প্রতিক্রিয়া শুরু হওয়ার 20 থেকে 40 মিনিটের পরে যথাক্রমে 5 সেকেন্ডের জন্য মিশ্রণ করুন।
৫. ঠিক minutes০ মিনিটের পরে, প্রতিক্রিয়া বন্ধ করতে টিসিএ দ্রবণটির 2 মিলি যোগ করুন, মিশ্রণ করুন এবং আরও 20 মিনিটের জন্য 37º সি তে মিশ্রিত করুন।
6. 15 মিনিটের জন্য 5000 আরপিএম এ সেন্ট্রিফিউজ।

7. পাইপেট 1 মিলি সুপারেনট্যান্ট সাবধানে একটি পাস্তর পিপেট সহ একটি কোয়ার্টজ কিউবেট এবং 275 এনএম এ শোষণ (যেমন) পড়ুন।

ব্ল্যাক
1.পাইপেট 1.4 মিলি বোরেট বাফার এবং 0.4 মিলি ফাইব্রিনোজেন সাবস্ট্রেট দ্রবণকে সেন্ট্রিফিউজড টেস্ট টিউবে পরিণত করে এবং 5 মিনিটের জন্য একটি 37º সি জল স্নানের মধ্যে জ্বালান।
2. থ্রম্বিন দ্রবণ এবং ঘূর্ণির ঠিক 0.1 মিলি যুক্ত করুন।
ঠিক 10 মিনিটের পরে, 2 মিলি টিসিএ দ্রবণ যোগ করুন এবং 5 সেকেন্ডের জন্য মিশ্রণ করুন।
4. দ্রবণে 0.1 মিলি নমুনা যুক্ত করুন, 5 সেকেন্ডের জন্য মিশ্রণ করুন, এবং ঠিক 20 মিনিটের জন্য 37ºC এ ছড়িয়ে দিন।
5. 15 মিনিটের জন্য 5000 আরপিএম এ সেন্ট্রিফিউজ।
6. পাইপেট 1 মিলি সুপারেনট্যান্ট সাবধানতার সাথে একটি পাসপোর্ট পাইপ সঙ্গে একটি কোয়ার্টজ কিউবেট মধ্যে এবং শোষণ পড়ুন (আব) 275 এনএম। (* 2)

গণনা
(যেমন - আব) 1 ঘ
এফইউ / জি = _____________ এক্স ________ এক্স _______ এক্স ডি
0.01 60 0.1

ডি = হতাশার ফ্যাক্টর (1 / ওজন (ছা / এমএল))

সনদপত্রের বিশ্লেষণ

প্যাকেজিং এবং স্টোরেজ

সলিড ফুড প্যাকেজিং ব্যাগ, 25 কেজি / ব্যারেল।

নাটোকিনেস শুকনো, শীতল এবং ভাল বায়ুচলাচল জায়গায় সূর্য, তাপ থেকে দূরে সংরক্ষণ করা উচিত।

অর্থ প্রদান:টি / টি, পেপাল, ওয়েস্টার্ন ইউনিয়ন, আলিবাবা বাণিজ্য আশ্বাস, ভিসা, মাস্টারকার্ড, ই-চেকিং, পরে প্রদান করুন, এলসি এবং অন্যান্য