পেপটিডেস

b. Take 1.00mL of each of the above personnel (parallel test is required), add 5.00mL of 0.4mol / L sodium carbonate solution, 1.00mL of Folin reagent use solution, place in a 40 ± 0.2 ℃ water bath for 20min, and take it out. Use a spectrophotometer at a wavelength of 680nm and 10mm cuvette. Take the "0" tube containing no tyrosine as blanks, and measure the absorbance respectively. Take the absorbance A as the ordinate and the tyrosine concentration c as the abscissa. , Draw a standard curve (this curve should pass the zero point).

According to the plot or the regression equation, the amount of tyrosine (ug) when the absorbance is 1 is calculated, which is the absorbance constant K value. Its K value should be in the range of 95-100.

2 Determination
(1) Preparation of Peptidase
a. Weigh 1~2g of enzyme powder, accurate to 0.0002g (or absorb 1.00mL of liquid enzyme), dissolve with a small amount of pH6.0 buffer solution, and grind it with a glass rod, then carefully pour the supernatant into a volumetric flask. Add a small amount of the above-mentioned buffer solution to the sediment to dissolve it, and grind it for 3 to 4 times, and finally transfer it all into a volumetric flask, make up to volume with the buffer solution, and shake well. Filter through four layers of gauze, and the filtrate is once again diluted to the appropriate concentration with a buffer according to the enzyme activity for measurement (diluted to the measured absorbance within the range of 0.25 to 0.40).
b. For the determination of enzyme powder, refer to Table A4 for the dilution factor (liquid enzyme can also refer to Table A4 for dilution).

(2) Measurement

a. First put the casein solution into a 40 ± 0.2 ℃ constant temperature water bath and preheat for 5min.
b. Follow the procedure below:
Test tube A (blank)
→ Add 1.00mL of enzyme solution (40 ± 0.2 ℃)
→ Add 2.00mL of trichloroacetic acid (shake well) (40 ± 0.2 ℃)
→ Add casein 1.00mL (shake well)
→ Take it out for 10 minutes and filter
→ take 1.00mL filtrate
→ Add sodium carbonate solution 5.00mL
→ 1.00 mL of Jiafulin reagent solution (40 ± 0.2 ℃, color development 20min)
→ At a wavelength of 680nm, measure its absorbance with a 10mm cuvette

Test tube B (enzyme sample, three parallel samples are required)
→ Add 1.00mL of enzyme solution (40 ± 0.2 ℃)
→ Add casein 1.00mL (shake well, react at 40 ± 0.2 ℃ for 10min)
→ Add 2.00mL of trichloroacetic acid (shake well)
→ Take it out for 10 minutes and filter
→ take 1.00mL filtrate
→ Add sodium carbonate solution 5.00mL
→ 1.00 mL of Jiafulin reagent solution (40 ± 0.2 ℃, color development 20min)
→ At a wavelength of 680nm, measure its absorbance with a 10mm cuvette

Calculation
X = A × K × 4/10 × n = 2/5 × A × K × n
In the formula:
X ---- enzyme activity of the sample, u / g (u / mL);
A ---- The average absorbance of the sample in parallel test;
K ---- absorption constant;
4 ---- the total volume of the reaction;
10 --- reaction time 10min, calculated as 1min;
n ---- Dilution multiple.

The result obtained is expressed as an integer.

The allowable difference between the results of parallel tests shall not exceed 3%.

CERTIFICATE OF ANALYSIS 

পেপটিডেস সংজ্ঞা

1 গ্রাম এনজাইম পাউডার (বা 1 এমএল তরল এনজাইম), 40 â „at, পিএইচ 6.0 এ, 1 এমএন হাইড্রোলাইজস কেসিনকে ইউ / জি (ইউ / এমএল) এ এনজাইম ক্রিয়াকলাপ ইউনিট হিসাবে 1ug টাইরোসিন উত্পাদন করতে।

ফরিন্ট পদ্ধতি

নীতিমালাপেপটিডেস
পেপটিডেস hydrolyzes casein substrates at 40 ° C and pH 6.0 to produce amino acids containing phenolic groups. Under alkaline conditions, Folin reagent is reduced to form molybdenum blue and tungsten blue. Measure with spectrophotometer and calculate. Its enzyme activity.

রিএজেন্টস এবং সমাধান
1 Preparation of পেপটিডেস
2000 মিলি মিল-মুখের রিফ্লো ডিভাইসে, 100 গ্রাম সোডিয়াম টংস্টেট (Na2WO4 · 2H2O), 25 গ্রাম সোডিয়াম মলিবডেট (Na2MOO4 · 2H2O), 700 মিলি জল, 85% ফসফরিক এসিডের 50 মিলি, 100 মিলি ঘন যুক্ত করুন হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড, 10 ঘন্টার জন্য কম তাপের উপরে ফোটান, রিফ্লাক্স কুলারটি সরিয়ে ফিউম হুডে, 50 গ্রাম লিথিয়াম সালফেট (LiSO4), 50 মিলি জল এবং কয়েক ফোটা ঘন ব্রোমিন জল (99%) যোগ করুন এবং এর জন্য সিদ্ধ করুন 15 মিনিট অতিরিক্ত ব্রোমিন অপসারণ করতে (ঠান্ডা হওয়ার পরে সবুজ ব্রোমিন জল যোগ করুন এবং সামান্য ফোটা অতিরিক্ত ব্রোমিন সরান), ঠান্ডা করুন, 1000 মিলি এমএল পরিমাণ জল মিশিয়ে ভাল মিশ্রণ করুন এবং ফিল্টার করুন। রিজেন্টসগুলি সোনার হলুদ হওয়া উচিত এবং বাদামী বোতলগুলিতে সংরক্ষণ করা উচিত।
সমাধান ব্যবহার করুন: ফুলিন রিএজেন্টের এক অংশ দুটি অংশের সাথে মিশিয়ে ভাল করে নেড়ে দিন।
2 সোডিয়াম কার্বনেট দ্রবণ সি (Na2CO3) = 0.4 মোল / এল
42.4 গ্রাম অ্যানহাইড্রস সোডিয়াম কার্বনেট নিন, পানিতে দ্রবীভূত করুন এবং 1000 মিলি পর্যন্ত মিশ্রণ করুন।
3 ট্রাইক্লোরোসেটিক অ্যাসিড সি (সিসিএল 3 · সিওওএইচ) = 0.4 মোল / এল
ট্রিক্লোরোয়েসেটিক অ্যাসিড 65.4 গ্রাম পানিতে পানিতে দ্রবীভূত হন এবং 1000 মিলি পর্যন্ত মিশ্রণ পান।
4 সোডিয়াম হাইড্রোক্সাইড দ্রবণ সি = 0.5mol / এল
জিবি 601 অনুসারে প্রস্তুত।
5 হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড দ্রবণ সি = 1 মিল / এল এবং 0.1 মিলিল / এল
জিবি 601: 90 মিলি হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড পরিমাপ করুন, 1000mL জলে .ালুন এবং 1 মিল / এল হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড পেতে কাঁপুন।
9 মিলি হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড পরিমাপ করুন, এটি 1000 মিলি জলে pourালুন এবং 0.1 মিলল / এল হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড পেতে কাঁপুন।
6 বাফার সমাধান
ফ্লেভারের প্রোটিনগুলির জন্য ফসফেট বাফার (পিএইচ = 6.0)
ওজন 45.23 গ্রাম ডিস্টোডিয়াম হাইড্রোজেন ফসফেট (Na2HPO4 · 12H2O) এবং 8.07 গ্রাম সাইট্রিক অ্যাসিড (C6H6O7 · H2O) পানিতে দ্রবীভূত হয় এবং 1000 মিলি এমএল পর্যন্ত তৈরি করে। প্রস্তুতির পরে, এটি সংশোধন করার জন্য একটি পিএইচ মিটার ব্যবহার করুন।
7 10 জি / এল কেসিন (কেসিন) সমাধান
কেসিনের ওজন 1.000g, যথাযথ 0.001g, 0.5mol / L সোডিয়াম হাইড্রোক্সাইড দ্রবণের একটি অল্প পরিমাণে ভিজা, প্রায় 80 মিলি পিএইচ 6.0 বাফার যোগ করুন এবং পুরো দ্রবীভূত হওয়া পর্যন্ত একটি ফুটন্ত পানির স্নানগুলিতে গরম করার সময় নাড়ুন। , 100 এমএল ভলিউম্যাট্রিক ফ্লাস্কে স্থানান্তর করুন এবং পিএইচ 6.0 বাফার দিয়ে চিহ্নটি মিশ্রণ করুন। এই দ্রবণটি ফ্রিজে 3 দিনের জন্য সংরক্ষণ করা হয়।
8 100ug / এমএলএল-টাইরোসিন স্ট্যান্ডার্ড সমাধান
ক। ওজনে 0.1000 গ্রাম এল-টাইরোসিন 105 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডের ধ্রুবক ওজনের কাছে শুকিয়ে যায়, এটি 0.0002 গ্রাম অবধি সঠিক, এবং 100 মিলি পর্যন্ত তৈরি করতে 1 মোল / এল হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিডের 60 মিলি সঙ্গে দ্রবীভূত হয়।
খ। পাইপেটে 1 মিলিগ্রাম / এমএল টাইরোসিন স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণটির 10.00 এমএল এবং 100 এমজি / এমএলএল-টাইরোসিন স্ট্যান্ডার্ড সমাধান পেতে 0.1 মিল / এল হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড দিয়ে 100 মিলি পর্যন্ত তৈরি করুন।

Instruments and equipment Of পেপটিডেস
1 ধ্রুবক তাপমাত্রার পানির স্নান: 40 ± 0.2 â „ƒ ƒ
2 স্পেকট্রোফোটোমিটার: জিবি 9721 এর প্রয়োজনীয়তা পূরণ করা উচিত

Analysis steps Of পেপটিডেস
1 স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখা অঙ্কন
ক। এল-টাইরোসিন স্ট্যান্ডার্ড সলিউশন Table সারণি A3 অনুসারে প্রস্তুত

ছক এ 3

প্যাকেজিং এবং স্টোরেজ

সলিড ফুড প্যাকেজিং ব্যাগ, 25 কেজি / ব্যারেল।

পেপটিডেস should be sশুকনো, শীতল এবং ভাল বায়ুচলাচল জায়গায় সূর্য, তাপ থেকে দূরে নিক্ষেপ।

অর্থ প্রদান:টি / টি, পেপাল, ওয়েস্টার্ন ইউনিয়ন, আলিবাবা বাণিজ্য আশ্বাস, ভিসা, মাস্টারকার্ড, ই-চেকিং, পরে প্রদান করুন, এলসি এবং অন্যান্য